糖尿病养生科普宣传月--了解风险,了解应对(16)往期回顾 本期摘要 采用高脂饮食和链脲佐菌素构建C57BL/6雄性小鼠2型糖尿病(T2DM)模型。研究了TAC/MSC复合物对小鼠体重、摄食量、血糖、葡萄糖和胰岛素耐受、血清生化指标以及肝脏活性氧(ROS)的影响。结果表明,TAC/MSC复合物能够改善小鼠体重下降、多食及血糖升高的症状,TAC及TAC/MSC可有效缓解小鼠胰岛素耐受并提高葡萄糖耐受。血清生化指标检测结果显示,与模型组相比,TAC/MSC高剂量组可显著增加血清高密度脂蛋白(HDL-C)含量,降低血清TG、低密度脂蛋白(LDL-C)和T-CHO含量。与阳性对照二甲双胍(Met)组比较,TAC/MSC高剂量组可以显著增加谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,对过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)含量的影响相当,并显著减少肝脏ROS含量。研究结果表明,TAC/MSC复合物能显著降低小鼠血清脂质并提高T2DM小鼠的抗氧化能力。小鼠组织结构的研究结果表明,TAC/MSC复合物能够改善心肌细胞排列松散的状态,保护胰腺、肾脏结构的完整,还能通过减少肝脏脂质沉积、胶原纤维含量来减轻肝脏病理变化。 图7 各药物治疗组对高脂饮食和链脲佐菌素诱导的小鼠体重、摄食量、血糖的影响 (A)14周期间动物实验流程;(B-D)小鼠经高脂饮食和链脲佐菌素诱导2型糖尿病后,在给药开始的第10周和第14周分别测量小鼠的体重、摄食量、血糖(n=6,Mean±SD;注:与Control(Week 14)相比,**p < 0.01, ***p < 0.001;与Model(Week 14)相比,#p < 0.05,##p < 0.01, ###p < 0.001;与TAC-H(Week 14)相比,&p < 0.05) 图8 各药物治疗组对高脂饮食和链脲佐菌素诱导的小鼠葡萄糖耐量的影响 (A)各组小鼠在注射20%葡萄糖溶液以后于15、30、60、90、120 min测得的血糖值;(B)各组小鼠经Graphpad软件计算葡萄糖时间曲线下面积(n=6,Mean±SD;注:与Control相比, ***p < 0.001;与Model相比,#p < 0.05,##p < 0.01, ###p < 0.001;与Met相比,@p < 0.05;与TAC-H相比,&p < 0.05) 表2 各药物治疗组对高脂饮食和链脲佐菌素诱导的小鼠各器官质量的影响 注:与Control相比,***p < 0.001;与Model相比, #p < 0.05,##p < 0.01,###p < 0.001 图9 各药物治疗组对高脂饮食和链脲佐菌素诱导的小鼠心脏组织形态的影响,标尺为100 图10 各药物治疗组对高脂饮食和链脲佐菌素诱导的小鼠胰腺组织形态的影响,标尺为100μm,蓝色箭头是胰岛部位 图11 各药物治疗组对高脂饮食和链脲佐菌素诱导的小鼠肾脏组织形态的影响,标尺为100μm,蓝色箭头是肾小球部位 图12 各药物治疗组对高脂饮食和链脲佐菌素诱导的小鼠白色脂肪组织形态的影响,标尺为100μm 图13 各药物治疗组对高脂饮食和链脲佐菌素诱导的小鼠血清脂质含量的影响 (A-D)经不同药物口服给药一个月后处死各组小鼠收集血清,测得血清中HDL-C、TG、LDL-C、T-CHO的含量(n=5,Mean±SD;注:与Control相比,***p < 0.001;与Model相比,#p < 0.05,##p < 0.01, ###p < 0.001;与Met相比,@p < 0.05;与TAC-H相比,&p < 0.05) 图14 各药物治疗组的小鼠肝脏油红O、H&E、Masson染色切片成像图 油红O和H&E标尺均为100μm,Masson染色标尺为20μm。其中蓝色箭头为脂肪空泡(白色),黄色箭头是肝索,红色箭头是局灶性坏死,黑色箭头是胶原纤维(蓝色) 图15 各药物治疗组对高脂饮食和链脲佐菌素诱导的小鼠血清抗氧化酶含量的影响 (A-C)经不同药物口服给药一个月后处死各组小鼠收集血清,测得血清中CAT、GSH-Px、SOD的含量(n=5,Mean±SD;注:与Control相比, ***p < 0.001;与Model相比,#p < 0.01,##p < 0.001,###p < 0.001;与Met相比,@p < 0.05;与TAC-H相比,&p < 0.05) 图16 各药物治疗组对高脂饮食和链脲佐菌素诱导的小鼠肝脏ROS含量的影响,细胞核使用DAPI染色呈蓝色,ROS使用DHE染色呈红色,标尺为10μm 试验结论 1、采用高脂饮食和链脲佐菌素成功构建C57BL/6雄性小鼠T2DM模型;通过连续检测小鼠体重、摄食量和血糖的结果显示,TAC/MSC复合物能够改善小鼠体重下降、多食及血糖升高的症状;葡萄糖和胰岛素耐受实验结果显示,TAC/MSC复合物可显著提高T2DM小鼠葡萄糖耐受并缓解胰岛素耐受。 2、心脏、肾、胰腺白色脂肪组织的H&E染色结果显示,TAC/MSC复合物能够改善心肌细胞排列松散以及形态改变的状态,保护胰岛和肾脏结构的完整,可能通过调节白色脂肪来影响脂质代谢。 3、血清脂质生化指标和肝脏ROS结果显示,与模型组相比,TAC/MSC-H组可显著增加血清HDL-C含量,降低血清TG、LDL-C和T-CHO含量。TAC/MSC复合物高剂量组可以显著增加血清GSH-Px含量,对CAT、SOD酶含量与Met组影响相当,并能显著减少肝脏ROS含量,表明TAC/MSC能有效降低血脂,显著提高糖尿病小鼠的抗氧化能力。 4、肝脏H&E染色、油红O、Masson染色结果显示,TAC/MSC复合物能够保护肝脏结构,减少肝脏脂质沉积、胶原纤维含量,减轻肝脏病理变化。 |