糖尿病养生科普宣传月--了解风险,了解应对(15)上期回顾 本期摘要 肥胖引起的胰岛素抵抗是造成2型糖尿病的重要原因,特征是胰岛素信号通路受损,高浓度的血浆游离脂肪酸(Free Fatty acids,FFAs)与胰岛素抵抗有关。本期以人肝癌细胞(HepG2)细胞为模型,研究青钱柳三萜酸、硒甲基硒代半胱氨酸以及它们的复配物TAC/MSC复合物的体外细胞毒性和对细胞葡萄糖消耗的影响;建立PA诱导的胰岛素抵抗模型,研究TAC/MSC复合物对PA诱导后HepG2细胞糖脂代谢和PI3K/AKT信号通路的影响。细胞实验结果表明,TAC/MSC复合物能够有效促进胰岛素抵抗细胞葡萄糖消耗和糖原合成;同时,可有效降低细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(T-CHO)的含量并减少细胞内脂质沉积。 图2 TAC/MSC对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响 (n=3,Mean±SD;与Control相比,***p < 0.001;与Model相比,#p < 0.05,##p < 0.01, ###p < 0.001;与TAC 6 μg/mL相比,&&p < 0.01) 图3 TAC/MSC对PA诱导胰岛素抵抗HepG2细胞糖原合成量的影响 (n=3,Mean±SD;注:与Control相比, ***p < 0.001;与Model相比,##p < 0.01, ###p < 0.001;与TAC 6 μg/mL相比,&p < 0.05) 图4 TAC/MSC对PA诱导的胰岛素抵抗HepG2细胞内脂质含量的影响 (A,B)各给药组HepG2细胞先用100 μmol/mL的PA处理24 h,再分别用10 μg/mL的Met、5 μg/mL MSC、6 μg/mL TAC以及该浓度下TAC/MSC复合物处理24 h后的细胞内TC、TG的含量(n=3,Mean±SD;注:与Control相比, ***p < 0.001;与Model相比,#p < 0.05,##p < 0.01;与Met相比,@p < 0.05;与TAC相比,&p < 0.05) 图5 PA诱导的HepG2细胞经各种药物处理后的油红O染色图,标尺为100 μm,红色箭头是细胞内脂质(红色) 图6 TAC/MSC对PA诱导的HepG2细胞胰岛素信号通路的影响 (A)HepG2细胞先用100 μmol/mL的PA处理24 h,再分别用10 μg/mL的Met、5 μg/mL MSC、6 μg/mL TAC以及该浓度下TAC/MSC复合物处理24 h,细胞P-PI3K、PI3K、P-AKT、AKT、P- GSK3β和GSK3β蛋白含量经WB 实验分析的结果;(B-D)图 A 所示蛋白条带经 Image J 软件量化处理的结果(n=3,Mean±SD;与Control相比, ***p < 0.001;与Model相比,#p < 0.05, ##p < 0.01,###p < 0.001;与TAC-H相比,&p < 0.05) 试验结论 1、HepG2细胞增殖活性实验和细胞葡萄糖消耗实验表明,在实验浓度范围内TAC、MSC对细胞生长没有明显影响;TAC能显著促进HepG2细胞对葡萄糖的消耗;PA诱导后细胞葡萄糖消耗和糖原合成量结果显示,TAC/MSC复合物能够有效促进胰岛素抵抗细胞葡萄糖消耗和糖原合成。 2、HepG2细胞内脂质含量检测和油红O染色结果显示,TAC/MSC复合物可以有效降低PA诱导后HepG2细胞内TG、T-CHO的含量,并减少细胞内脂质沉积。 3、Western Blot检测结果显示,TAC、TAC/MSC组可以显著改善PA诱导后P-PI3K、P-AKT和P-GSK3β蛋白磷酸化表达降低的现象。相比TAC组,TAC/MSC复合物能显著增加PI3K和AKT磷酸化蛋白表达,进而激活下游GSK3β磷酸化来抑制糖异生并促进细胞中糖原的合成。 (未完待续) 相关链接:国家纳米药物工程技术研究中心 国家纳米药物工程技术研究中心由国家科技部批准成立,作为国家“重大新药创制”重大专项武汉综合性新药研究开发技术的特色技术平台,依托华中科技大学,由华中科技大学生命科学与技术学院、附属同济医院、附属协和医院等共同组建,拥有着雄厚的科研技术背景与国内顶尖的研发团队,其中有科学院院士5名、科学家1名,药物开发与工程技术人员100余人,博士、硕士研究生100余人。 国家纳米药物工程技术研究中心以“创新·务实·合作·共享”的理念,坚定深入的开展硒与青钱柳的深入研究,突破核心关键科研技术,促进富硒青钱柳产业结构转型升级,并将世界领先的科研技术和震撼人心的科研成果转化为有益于全民健康的恩施富硒青钱柳系列产品。 已成立的国家纳米药物工程技术中心富硒青钱柳产业化示范基地 |